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Avaliação histomorfométrica do efeito do extrato aquoso de urucum (norbixina) no processo de cicatrização de feridas cutâneas em ratos

Por: Tipo de material: ArtigoArtigoAssunto(s): Recursos online: Em: Revista Brasileira de Plantas Medicinais (Brazil) v. 16(3 suppl. 1) p. 637-643; (2014)Sumário: RESUMO: A norbixina é um carotenóide dicarboxílico hidrofílico presente no pericarpo das sementes do urucuzeiro (Bixa orellana L.). O urucum é comumente utilizado na indústria alimentícia e cosmética como corante natural. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo de reparo cicatricial de feridas cutâneas abertas de ratos tratadas com extrato aquoso de urucum contendo 2,5% de norbixina através de análise histomorfométrica. Para tanto, realizouse feridas cutâneas no dorso de 32 ratos Wistar machos. Estas foram tratadas com extrato de urucum (grupo experimental, n = 16) e solução salina 0,9% (grupo controle, n = 16). Aos 3, 7, 14 e 21 dias após realização do procedimento cirúrgico, os animais foram sacrificados. Os preparados histológicos obtidos foram submetidos à técnica de coloração pela HematoxilinaEosina (H.E.) para contagem de células inflamatórias e de fibroblastos; corados pelo azul de toluidina 1% para contagem dos mastócitos e com picrossirius-red para avaliação das fibras colágenas totais. As imagens histológicas destas lâminas foram capturadas por câmera digital acoplada ao microscópio óptico, sob foco fixo e clareza de campo, obtendo-se 10 campos por lâmina com aumento final de 400X. As fotomicrografias foram avaliadas através do software ImageJ. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste t de student sendo o valor de p considerado significativo para p< 0,05. O tratamento tópico com extrato de urucum utilizado aumentou o infiltrado inflamatório durante o 3º, 14º e 21º dia pós-operatório. O grupo tratado apresentou maior densidade vascular quando comparado ao controle a partir do 7º e menor quantidade de fibroblastos até o 14º dia pós-cirúrgico. Conclui-se que o extrato de urucum contendo 2,5% de norbixina não é inócuo aos tecidos cutâneos e possui efeitos pró-inflamatórios e pró-angiogênicos durante o processo de reparo tecidual cutâneo em ratos, interferindo no processo fisiológico de cicatrização. Palavras-chave: histologia, urucum, úlceras, pele.Sumário: ABSTRACT: Histomorphometric evaluation of the effects of the aqueous extract of annatto (norbixin) on wound skin healing in rats. Norbixin is a dicarboxylic water-soluble carotenoid present in the pericarp of the achiote (Bixa orellana L.) seed. Annatto is commonly used by the food and cosmetic industries as a natural pigment. The aim of this study was to evaluate the healing process of open dermal wounds of rats treated with an aqueous solution of annatto containing 2.5% of norbixin carried out by histomorphometric analysis. For this end, cutaneous wounds were made on the back of 32 male Wistar rats. The wounds were treated with annatto solution (experimental group, n = 16) and saline solution 0.9% (control group, n = 16). At 3, 7, 14 and 21 days after the surgical procedure, the animals were sacrificed. After histological preparation, the histological material was submitted to the staining technique with hematoxylineosin for the counting of inflammatory cells and fibroblasts, with toluidine blue 1% for mast cell counting and with picrosirius red for the total collagen fibers. The images of those histological slides were captured by a digital camera connected to an optical microscope, with fixed focal length and clear field; 10 fields were captured from each slide with final zoom of 400X. The photomicrographs were analyzed by the ImageJ software. The results were submitted to the Student’s t-test and the value of p < 0.05 was considered as relevant. The topical treatment with the annatto solution increased the inflammatory infiltrate during the 3rd, 14th and 21st days after surgery. The experimental group presented increased vascular density compared to the control group after the 7th day and a smaller amount of fibroblasts up to the 14th day after surgery. We concluded that the annatto solution containing 2.5% of norbixin is not innocuous to skin tissues and has proinflammatory and proangiogenic effects during the process of skin wound healing in rats, interfering in the physiological healing process. Keywords: histology; annatto; ulcers; skin.
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Publicação on-line; 32 ref.; 2 tables; Summaries (En, Pt)



RESUMO:

A norbixina é um carotenóide dicarboxílico hidrofílico presente no pericarpo das
sementes do urucuzeiro (Bixa orellana L.). O urucum é comumente utilizado na indústria
alimentícia e cosmética como corante natural. O objetivo deste trabalho foi avaliar o processo
de reparo cicatricial de feridas cutâneas abertas de ratos tratadas com extrato aquoso de
urucum contendo 2,5% de norbixina através de análise histomorfométrica. Para tanto, realizouse
feridas cutâneas no dorso de 32 ratos Wistar machos. Estas foram tratadas com extrato
de urucum (grupo experimental, n = 16) e solução salina 0,9% (grupo controle, n = 16). Aos 3,
7, 14 e 21 dias após realização do procedimento cirúrgico, os animais foram sacrificados. Os
preparados histológicos obtidos foram submetidos à técnica de coloração pela HematoxilinaEosina (H.E.)
para contagem de células inflamatórias e de fibroblastos; corados pelo azul de
toluidina 1% para contagem dos mastócitos e com picrossirius-red para avaliação das fibras
colágenas totais. As imagens histológicas destas lâminas foram capturadas por câmera digital
acoplada ao microscópio óptico, sob foco fixo e clareza de campo, obtendo-se 10 campos por
lâmina com aumento final de 400X. As fotomicrografias foram avaliadas através do software
ImageJ. Os resultados obtidos foram submetidos ao teste t de student sendo o valor de p
considerado significativo para p< 0,05. O tratamento tópico com extrato de urucum utilizado
aumentou o infiltrado inflamatório durante o 3º, 14º e 21º dia pós-operatório. O grupo tratado
apresentou maior densidade vascular quando comparado ao controle a partir do 7º e menor
quantidade de fibroblastos até o 14º dia pós-cirúrgico. Conclui-se que o extrato de urucum
contendo 2,5% de norbixina não é inócuo aos tecidos cutâneos e possui efeitos pró-inflamatórios
e pró-angiogênicos durante o processo de reparo tecidual cutâneo em ratos, interferindo no
processo fisiológico de cicatrização.

Palavras-chave: histologia, urucum, úlceras, pele.



ABSTRACT:

Histomorphometric evaluation of the effects of the aqueous extract of annatto
(norbixin) on wound skin healing in rats. Norbixin is a dicarboxylic water-soluble carotenoid
present in the pericarp of the achiote (Bixa orellana L.) seed. Annatto is commonly used by the
food and cosmetic industries as a natural pigment. The aim of this study was to evaluate the
healing process of open dermal wounds of rats treated with an aqueous solution of annatto
containing 2.5% of norbixin carried out by histomorphometric analysis. For this end, cutaneous
wounds were made on the back of 32 male Wistar rats. The wounds were treated with annatto
solution (experimental group, n = 16) and saline solution 0.9% (control group, n = 16). At 3,
7, 14 and 21 days after the surgical procedure, the animals were sacrificed. After histological
preparation, the histological material was submitted to the staining technique with hematoxylineosin
for the counting of inflammatory cells and fibroblasts, with toluidine blue 1% for mast cell
counting and with picrosirius red for the total collagen fibers. The images of those histological
slides were captured by a digital camera connected to an optical microscope, with fixed focal
length and clear field; 10 fields were captured from each slide with final zoom of 400X. The
photomicrographs were analyzed by the ImageJ software. The results were submitted to the
Student’s t-test and the value of p < 0.05 was considered as relevant. The topical treatment with
the annatto solution increased the inflammatory infiltrate during the 3rd, 14th and 21st days after
surgery. The experimental group presented increased vascular density compared to the control
group after the 7th day and a smaller amount of fibroblasts up to the 14th day after surgery. We
concluded that the annatto solution containing 2.5% of norbixin is not innocuous to skin tissues
and has proinflammatory and proangiogenic effects during the process of skin wound healing
in rats, interfering in the physiological healing process.

Keywords: histology; annatto; ulcers; skin.

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