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Análise fitoquímica e atividade antifúngica do óleo essencial de folhas de Lippia sidoides Cham. e do Timol contra cepas de Candida spp

Por: Tipo de material: ArtigoArtigoAssunto(s): Recursos online: Em: Revista Brasileira de Plantas Medicinais (Brazil) v. 17(4 suppl. 2) p. 836-844; (2015)Sumário: RESUMO: A resistência de fungos do gênero Candida aos fármacos químicos tem lançado o desafio de se identificar novas substâncias que possuam atividade antibiótica ou venham a modular o efeito de produtos atualmente usados contra candidíase. O presente estudo avaliou a atividade antifúngica do óleo essencial de Lippia sidoides Cham. e do timol, sobre cepas de Candida. Inicialmente os produtos foram testados frente a 16 cepas fúngicas pela técnica de difusão em meio sólido, o que permitiu selecionar linhagens para continuidade da pesquisa. Com as linhagens de Candida krusei (CK LMBM 01, CK LMBM 02), Candida albicans (CA LM 62) e Candida tropicalis (CT LM 20), procedeu-se, por microdiluição em caldo, a determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e em meio sólido, a Concentração Fungicida Mínima (CFM) dos produtos foi identificada. O microcultivo das leveduras em meio empobrecido foi realizado para verificação de alterações morfológicas e, além disso, uma análise da composição química do óleo foi realizada por Cromatografia Gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Nesta análise, o constituinte majoritário foi o timol (84,95%), seguido de compostos como p-cimeno e Éter metil carvacrol, entre outros. A CIM do óleo essencial de Lippia sidoides Cham. frente às cepas variou entre 64 e 256 μg/mL, enquanto a CIM do timol foi estabelecida entre 32 e 64 μg/mL. A CFM do óleo essencial foi determinada entre 128 e 512 μg/mL e para o timol foram encontrados valores entre 64 e 128 μg/mL. Em relação à análise micromorfológica, verificada nas concentrações de CIM e CIM x 2, o óleo essencial inibiu o dimorfismo das cepas CK 01 e CT 20 na CIM e quando foi ensaiado o timol, este, na CIM, impediu a transição morfológica das cepas CK 01 e CA 62. Uma redução da morfogênese também foi obsevada na cepa CT 20, porém apenas em CIM x 2 e de forma mais discreta. Os resultados enaltecem o potencial antifúngico de L. sidoides e de seu composto majoritário timol tanto no combate à Candida quanto na neutralização de um dos fatores de virulência, a capacidade invasiva por formação de hifas e pseudohifas verificado na condição patogênica da candidíase. Estes dados são promissores e poderão incentivar futuras pesquisas sobre os aspectos fitoquímicos, toxicológicos e farmacológicos tanto do óleo essencial de Lippia sidoides como também de seus componentes químicos. Palavras-chaves: Lippia sidoides, timol, atividade antifúngica, inibição de virulênciaSumário: ABSTRACT: Phytochemical analysis and antifungal activity of the essential oil of Lippia sidoides Cham. and of the Thymol against Candida strains. The resistance of the Candida against drugs has been a challenge to the discovery of new substances with antimicrobial or modulatory effects that could be used against the cadidiasis. This work evaluated the antifungal activity of the essential oil of Lippia sidoides Cham. and of the Thymol against Candida strains. The products were tested towards 16 strains of Candida using the diffusion method, which allowed to select the strains in order to proceed with the research. The strains of Candida krusei (CK LMBM 01, CK LMBM 02), Candida albicans (CA LM 62) and Candida tropicalis (CT LM 20) were assayed by the microdilution method so that the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and the Minimal Fungicide Concentration (MFC) could be determined. The morphogenesis of the Candida was evaluated using poor environment in order to observe morphological changes. The composition of the essential oil was determined by GC-MS. The main compound observed was the thymol (84.95%). The MIC of the essential oil of L. sidoides and Thymol ranged between 64 to 256 μg/mL, and between 32 to 64 μg/mL respectively. The MFC of the essential oil and the thymol varied between 128 to 512 μg/mL and 64 to 128 μg/mL respectively. The morphogenesis of different Candida strains was inhibited in the MIC and MICx2 to the essential oil and thymol. The results indicated the antifungal potential of the L. sidoides and of the Thymol due to the inhibition of the invasive capacity, one of the most important virulence factors for the candidiasis` development. These results are promising to new researches about the phytochemical, toxicological and pharmacological aspects of the essential oil of L. sidoides and its phytochemical compounds. Keywords: Lippia sidoides, thymol, antifungal activity, inhibition of virulence.
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Publicação on-line; 39 ref.; 3 tables; 1 illus.; Summaries (En, Pt)



RESUMO:

A resistência de fungos do gênero Candida aos fármacos químicos tem lançado o
desafio de se identificar novas substâncias que possuam atividade antibiótica ou venham a
modular o efeito de produtos atualmente usados contra candidíase. O presente estudo avaliou
a atividade antifúngica do óleo essencial de Lippia sidoides Cham. e do timol, sobre cepas de
Candida. Inicialmente os produtos foram testados frente a 16 cepas fúngicas pela técnica de
difusão em meio sólido, o que permitiu selecionar linhagens para continuidade da pesquisa.
Com as linhagens de Candida krusei (CK LMBM 01, CK LMBM 02), Candida albicans (CA LM
62) e Candida tropicalis (CT LM 20), procedeu-se, por microdiluição em caldo, a determinação
da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e em meio sólido, a Concentração Fungicida Mínima
(CFM) dos produtos foi identificada. O microcultivo das leveduras em meio empobrecido foi
realizado para verificação de alterações morfológicas e, além disso, uma análise da composição
química do óleo foi realizada por Cromatografia Gasosa acoplada à espectrometria de massas
(CG-EM). Nesta análise, o constituinte majoritário foi o timol (84,95%), seguido de compostos
como p-cimeno e Éter metil carvacrol, entre outros. A CIM do óleo essencial de Lippia sidoides
Cham. frente às cepas variou entre 64 e 256 μg/mL, enquanto a CIM do timol foi estabelecida
entre 32 e 64 μg/mL. A CFM do óleo essencial foi determinada entre 128 e 512 μg/mL e para o
timol foram encontrados valores entre 64 e 128 μg/mL. Em relação à análise micromorfológica,
verificada nas concentrações de CIM e CIM x 2, o óleo essencial inibiu o dimorfismo das
cepas CK 01 e CT 20 na CIM e quando foi ensaiado o timol, este, na CIM, impediu a transição
morfológica das cepas CK 01 e CA 62. Uma redução da morfogênese também foi obsevada
na cepa CT 20, porém apenas em CIM x 2 e de forma mais discreta. Os resultados enaltecem
o potencial antifúngico de L. sidoides e de seu composto majoritário timol tanto no combate
à Candida quanto na neutralização de um dos fatores de virulência, a capacidade invasiva
por formação de hifas e pseudohifas verificado na condição patogênica da candidíase. Estes
dados são promissores e poderão incentivar futuras pesquisas sobre os aspectos fitoquímicos,
toxicológicos e farmacológicos tanto do óleo essencial de Lippia sidoides como também de
seus componentes químicos.

Palavras-chaves: Lippia sidoides, timol, atividade antifúngica, inibição de virulência



ABSTRACT:

Phytochemical analysis and antifungal activity of the essential oil of Lippia
sidoides Cham. and of the Thymol against Candida strains. The resistance of the Candida
against drugs has been a challenge to the discovery of new substances with antimicrobial or
modulatory effects that could be used against the cadidiasis. This work evaluated the antifungal
activity of the essential oil of Lippia sidoides Cham. and of the Thymol against Candida strains.
The products were tested towards 16 strains of Candida using the diffusion method, which
allowed to select the strains in order to proceed with the research. The strains of Candida krusei
(CK LMBM 01, CK LMBM 02), Candida albicans (CA LM 62) and Candida tropicalis (CT LM 20)
were assayed by the microdilution method so that the Minimal Inhibitory Concentration (MIC)
and the Minimal Fungicide Concentration (MFC) could be determined. The morphogenesis
of the Candida was evaluated using poor environment in order to observe morphological
changes. The composition of the essential oil was determined by GC-MS. The main compound
observed was the thymol (84.95%). The MIC of the essential oil of L. sidoides and Thymol
ranged between 64 to 256 μg/mL, and between 32 to 64 μg/mL respectively. The MFC of the
essential oil and the thymol varied between 128 to 512 μg/mL and 64 to 128 μg/mL respectively.
The morphogenesis of different Candida strains was inhibited in the MIC and MICx2 to the
essential oil and thymol. The results indicated the antifungal potential of the L. sidoides and of
the Thymol due to the inhibition of the invasive capacity, one of the most important virulence
factors for the candidiasis` development. These results are promising to new researches about
the phytochemical, toxicological and pharmacological aspects of the essential oil of L. sidoides
and its phytochemical compounds.

Keywords: Lippia sidoides, thymol, antifungal activity, inhibition of virulence.

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