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Estimativa da viabilidade polínica de araçazeiro (Psidium cattleianum Sabine) através de distintos métodos de coloração

Por: Tipo de material: ArtigoArtigoAssunto(s): Recursos online: Em: Revista Brasileira de Plantas Medicinais (Brazil) v. 18(1) p. 134-141; (2016)Sumário: RESUMO: A análise histoquímica dos grãos de pólen através do uso de corantes permite a determinação de sua viabilidade polínica. O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência dos corantes orceína acética 2% e reativo de Alexander modificado, para estimar a viabilidade polínica de vinte acessos de araçazeiro (Psidium cattleianum Sabine) – uma árvore de frutos muito apreciados que também é utilizada para fins medicinais. Botões florais na pré-antese foram coletados e fixados em etanol:ácido acético (3:1) por 24 horas, após os botões foram transferidos para etanol 70% e mantidos sob refrigeração. A técnica de esmagamento das anteras foi utilizada no preparo das lâminas. Para cada acesso foram preparadas 2 lâminas por corante e analisados 500 grãos de pólen por lâmina. A viabilidade polínica foi estimada através da porcentagem de grãos de pólen viáveis. De modo geral, observou-se que os grãos de pólen corados com orceína acética 2% apresentaram viabilidade alta, acima de 98,1%, e os acessos não diferiram entre si. A viabilidade polínica através da coloração com a solução de Alexander variou de 43% (acesso Silveira Martins 1) a 97% (acesso Candelária 1), mostrando que provavelmente exista variabilidade genética entre os acessos. Em apenas dois acessos não houve diferença significativa entre os valores de viabilidade encontrados através dos dois corantes testados. Conclui-se então que a orceína acética 2% superestimou a viabilidade polínica de P. cattleianum e que o reativo de Alexander é o mais preciso, devido a sua dupla coloração (verde de malaquita + fucsina ácida). Assim, indica-se o reativo de Alexander para análise de estimativa da viabilidade polínica de genótipos de araçá envolvidos em um programa de melhoramento genético. Palavras-chave: Araçá, orceína acética, reativo de Alexander, viabilidade polínicaSumário: ABSTRACT: Estimation of pollen viability of strawberry guava (Psidium cattleianum Sabine) through distinct staining methods. The histochemical analysis of pollen grains through the use of stains makes it possible to determine their pollen viability. The purpose of this study was to compare the efficiency of 2% acetic orcein and Alexander’s stain modified, in estimating the pollen viability of twenty strawberry guava accessions (Psidium cattleianum Sabine) – a valued fruit tree which is used for medicinal purposes. Pre-anthesis flower buds were collected and fixed in ethanol:acetic acid (3:1 v/v) for 24 hours at room temperature, subsequently they were stored in 70% ethanol under refrigeration. The anther squash technique was performed for slide preparation. In each accession two slides per stain and 500 pollen grains were analyzed. The pollen viability was estimated according to the percentage of viable pollen grains. Overall, it was observed that pollen grains stained with 2% acetic orcein evinced a high viability, higher than 98,1%, and the accessions did not differ. The pollen viability estimated with Alexander’s stain varied from 43% (accession of Silveira Martins 1) to 97% (accession of Candelária 1), indicating that there is probably genetic variability among the accessions. There was no significant difference among the levels of viability found by means of the two stains in only two accessions. In conclusion, 2% acetic orcein overestimated the pollen viability of P. cattleianum, whereas the Alexander’s stain is in turn more accurate due to its two stains (green malachite and fuchsine). Thus, it is indicated Alexander’s stain for analysis estimation of pollen viability of strawberry guava genotypes involved in a genetic improvement program. Keywords: strawberry guava, acetic orcein, Alexander’s stain, pollen viability
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RESUMO:

A análise histoquímica dos grãos de pólen através do uso de corantes permite a
determinação de sua viabilidade polínica. O objetivo deste estudo foi comparar a eficiência
dos corantes orceína acética 2% e reativo de Alexander modificado, para estimar a viabilidade
polínica de vinte acessos de araçazeiro (Psidium cattleianum Sabine) – uma árvore de frutos
muito apreciados que também é utilizada para fins medicinais. Botões florais na pré-antese
foram coletados e fixados em etanol:ácido acético (3:1) por 24 horas, após os botões foram
transferidos para etanol 70% e mantidos sob refrigeração. A técnica de esmagamento das
anteras foi utilizada no preparo das lâminas. Para cada acesso foram preparadas 2 lâminas
por corante e analisados 500 grãos de pólen por lâmina. A viabilidade polínica foi estimada
através da porcentagem de grãos de pólen viáveis. De modo geral, observou-se que os grãos
de pólen corados com orceína acética 2% apresentaram viabilidade alta, acima de 98,1%, e
os acessos não diferiram entre si. A viabilidade polínica através da coloração com a solução de
Alexander variou de 43% (acesso Silveira Martins 1) a 97% (acesso Candelária 1), mostrando
que provavelmente exista variabilidade genética entre os acessos. Em apenas dois acessos
não houve diferença significativa entre os valores de viabilidade encontrados através dos dois
corantes testados. Conclui-se então que a orceína acética 2% superestimou a viabilidade
polínica de P. cattleianum e que o reativo de Alexander é o mais preciso, devido a sua dupla
coloração (verde de malaquita + fucsina ácida). Assim, indica-se o reativo de Alexander para
análise de estimativa da viabilidade polínica de genótipos de araçá envolvidos em um programa
de melhoramento genético.

Palavras-chave: Araçá, orceína acética, reativo de Alexander, viabilidade polínica



ABSTRACT:

Estimation of pollen viability of strawberry guava (Psidium cattleianum
Sabine) through distinct staining methods. The histochemical analysis of pollen grains
through the use of stains makes it possible to determine their pollen viability. The purpose of
this study was to compare the efficiency of 2% acetic orcein and Alexander’s stain modified,
in estimating the pollen viability of twenty strawberry guava accessions (Psidium cattleianum
Sabine) – a valued fruit tree which is used for medicinal purposes. Pre-anthesis flower buds
were collected and fixed in ethanol:acetic acid (3:1 v/v) for 24 hours at room temperature,
subsequently they were stored in 70% ethanol under refrigeration. The anther squash technique
was performed for slide preparation. In each accession two slides per stain and 500 pollen grains
were analyzed. The pollen viability was estimated according to the percentage of viable pollen
grains. Overall, it was observed that pollen grains stained with 2% acetic orcein evinced a high
viability, higher than 98,1%, and the accessions did not differ. The pollen viability estimated
with Alexander’s stain varied from 43% (accession of Silveira Martins 1) to 97% (accession of
Candelária 1), indicating that there is probably genetic variability among the accessions. There
was no significant difference among the levels of viability found by means of the two stains in
only two accessions. In conclusion, 2% acetic orcein overestimated the pollen viability of P.
cattleianum, whereas the Alexander’s stain is in turn more accurate due to its two stains (green
malachite and fuchsine). Thus, it is indicated Alexander’s stain for analysis estimation of pollen
viability of strawberry guava genotypes involved in a genetic improvement program.

Keywords: strawberry guava, acetic orcein, Alexander’s stain, pollen viability

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