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MDGC-MS analysis of essential oils from Protium heptaphyllum (Aubl.) and their antifungal activity against Candida specie

Por: Tipo de material: ArtigoArtigoAssunto(s): Recursos online: Em: Revista Brasileira de Plantas Medicinais (Brazil) v. 18(2) p. 531-538; (2016)Sumário: ABSTRACT: Protium heptaphyllum is found in the Amazon region, and in various Brazilian states and South American countries. Also Known as almecega, it produces an oil resin used in traditional medicine as analgesic, anti-inflammatory, cicatrizant and expectorant, it is rich in pentacyclic triterpenes and essential oil. The main objective of this study was to analyze the chemical composition of P. heptaphyllumresin (OEPh) over different extraction times and to evaluate their antifungal activity against Candida species, obtained from gardeners with onychomycosis, using the disk diffusion method. The OEPh was obtained by hydrodistillation and analyzed by Multidimensional Gas Chromatography coupled with Mass Spectrometry (MDGC / MS). Candida species were obtained from lesions on the nails of horticulturist from a community garden in the city of Teresina, Piauí, Brazil. The antifungal activity in concentrations of 1000 µg/L, 500 µg/L and 250 µg/L, PROTOCOL M44-A2 (CLSI 2009) OEPh was tested. The main constituents identified were: l-limonene, α-terpineol, p-cineol, o-cymene and α-phellandrene, however, its composition varies significantly with extraction time. All species, except C. rugosa, were inhibited with halo (≥ 14 mm) at 1000 μg / L. C. krusei is naturally resistant to the drug fluconazole, but when tested with OEPh the clinical species (case 9) demonstrated sensitivity in three dilutions (halo ≤ 10 ≥ 14) and the standard strain was inhibited at concentration of 1000 μg/Lg / L (halo 14mm). A similar situation also occurred with the standard strain of C. parapsilosis (halo ≥ 11mm). OEPh has considerable antifungal activity, which merits further investigation for alternative clinical applications, since this species is widely distributed in our community, and it presents good yields, and also has important therapeutic applications. Key words: Protiumheptaphyllum, Análise Química, Candida, susceptibilidade, onicomicosesSumário: RESUMO: Análise MDGC-MS de óleos essenciais de Protium heptaphyllum (Aubl.) e sua atividade antifúngica contra espécies de Candida. Protium heptaphyllum é encontrada na região amazônica, em vários estados do Brasil e países da América do Sul. Conhecida como almecega produz uma resina oleosa usada na medicina popular como analgésica, antiinflamatória, cicatrizante e expectorante, é rica em triterpenos pentaciclicos e óleo essencial. O objetivo principal do presente trabalho foi analisar a composição química do óleo essencial da resina P. heptaphyllum (OEPh) em diferentes tempo de extração e avaliarsuaatividade antifúngica contra espécies de Candida, isoladas de horticultores com onicomicoses, por método de disco-difusão. O OEPh foi obtido por hidrodestilação, analisado por Cromatografia Gasosa Multidimensinal Acoplada a Espectrometria de Massas (MDGC/MS). As espécies de Candida foram obtidas de lesões nas unhas de horticultores de uma horta comunitária na cidade de Teresina, Piauí, Brasil. Testou-se a atividade antifúngica do OEPhnas concentrações de 1000 μg/L, 500 μg/L e 250 μg/L, protocolo M44-A2 (CLSI 2009). Os principais constituintes identificados foram l- limoneno, α-terpineol, p-cineol, o-cimeno e α-felandreno, entretanto, sua composição varia significativamente em decorrência do tempo de extração. Todas as espécies, exceto a C. rugosa, foram inibidas com halo ( Χ ≥ 14 mm) na concentração de 1000 μg/L. C. krusei é naturalmente resistente ao fármaco fluconazol, mas quando testado com OEPh,a espécie clínico (caso 9) demonstrou sensibilidade nas três diluições (halo Χ ≤ 10 ≥ 14) e a cepa padrão foi inibida na concentração de 1000 μg/L (halo Χ 14mm). Fato semelhante também ocorreu com a cepa padrão de C. parapsilosis (halo Χ ≥ 11mm). O OEPh possui atividade antifúngica considerável, merecendo uma investigação mais aprofundada para aplicações clínicas alternativas, uma vez que esta espécie é amplamente distribuída em nossa comunidade, apresenta bom rendimento e, ainda, aplicações terapêuticas importantes. Palavra-chaves: Protium heptaphyllum, Análise Química, Candida, Susceptibilidade, Onicomicoses
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Publicação on-line; 42 ref.; 3 tables; 2 illus.; Summaries (En, Pt)



ABSTRACT:

Protium heptaphyllum is found in the Amazon region, and in various Brazilian
states and South American countries. Also Known as almecega, it produces an oil resin used
in traditional medicine as analgesic, anti-inflammatory, cicatrizant and expectorant, it is rich
in pentacyclic triterpenes and essential oil. The main objective of this study was to analyze
the chemical composition of P. heptaphyllumresin (OEPh) over different extraction times and
to evaluate their antifungal activity against Candida species, obtained from gardeners with
onychomycosis, using the disk diffusion method. The OEPh was obtained by hydrodistillation and
analyzed by Multidimensional Gas Chromatography coupled with Mass Spectrometry (MDGC /
MS). Candida species were obtained from lesions on the nails of horticulturist from a community
garden in the city of Teresina, Piauí, Brazil. The antifungal activity in concentrations of 1000
µg/L, 500 µg/L and 250 µg/L, PROTOCOL M44-A2 (CLSI 2009) OEPh was tested. The main
constituents identified were: l-limonene, α-terpineol, p-cineol, o-cymene and α-phellandrene,
however, its composition varies significantly with extraction time. All species, except C. rugosa,
were inhibited with halo (≥ 14 mm) at 1000 μg / L. C. krusei is naturally resistant to the drug
fluconazole, but when tested with OEPh the clinical species (case 9) demonstrated sensitivity
in three dilutions (halo ≤ 10 ≥ 14) and the standard strain was inhibited at concentration of 1000
μg/Lg / L (halo 14mm). A similar situation also occurred with the standard strain of C. parapsilosis
(halo ≥ 11mm). OEPh has considerable antifungal activity, which merits further investigation for
alternative clinical applications, since this species is widely distributed in our community, and it
presents good yields, and also has important therapeutic applications.

Key words: Protiumheptaphyllum, Análise Química, Candida, susceptibilidade, onicomicoses



RESUMO:

Análise MDGC-MS de óleos essenciais de Protium heptaphyllum (Aubl.) e
sua atividade antifúngica contra espécies de Candida. Protium heptaphyllum é encontrada
na região amazônica, em vários estados do Brasil e países da América do Sul. Conhecida
como almecega produz uma resina oleosa usada na medicina popular como analgésica, antiinflamatória,
cicatrizante e expectorante, é rica em triterpenos pentaciclicos e óleo essencial.
O objetivo principal do presente trabalho foi analisar a composição química do óleo essencial
da resina P. heptaphyllum (OEPh) em diferentes tempo de extração e avaliarsuaatividade
antifúngica contra espécies de Candida, isoladas de horticultores com onicomicoses, por
método de disco-difusão. O OEPh foi obtido por hidrodestilação, analisado por Cromatografia
Gasosa Multidimensinal Acoplada a Espectrometria de Massas (MDGC/MS). As espécies de
Candida foram obtidas de lesões nas unhas de horticultores de uma horta comunitária na
cidade de Teresina, Piauí, Brasil. Testou-se a atividade antifúngica do OEPhnas concentrações
de 1000 μg/L, 500 μg/L e 250 μg/L, protocolo M44-A2 (CLSI 2009). Os principais constituintes
identificados foram l- limoneno, α-terpineol, p-cineol, o-cimeno e α-felandreno, entretanto, sua
composição varia significativamente em decorrência do tempo de extração. Todas as espécies,
exceto a C. rugosa, foram inibidas com halo ( Χ ≥ 14 mm) na concentração de 1000 μg/L.
C. krusei é naturalmente resistente ao fármaco fluconazol, mas quando testado com OEPh,a espécie
clínico (caso 9) demonstrou sensibilidade nas três diluições (halo Χ ≤ 10 ≥ 14) e a cepa
padrão foi inibida na concentração de 1000 μg/L (halo Χ 14mm). Fato semelhante também
ocorreu com a cepa padrão de C. parapsilosis (halo Χ ≥ 11mm). O OEPh possui atividade
antifúngica considerável, merecendo uma investigação mais aprofundada para aplicações
clínicas alternativas, uma vez que esta espécie é amplamente distribuída em nossa comunidade,
apresenta bom rendimento e, ainda, aplicações terapêuticas importantes.

Palavra-chaves: Protium heptaphyllum, Análise Química, Candida, Susceptibilidade,
Onicomicoses

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