Publicação on-line; Bibliography p. 10-13 (69 ref.); 6 tables; 3 illus.; Summaries (En, Pt)

Abstract

Medicinal plants are an important therapeutic option for a large share of the world’s population. To establish
an in vitro culture system for the production of secondary metabolites from Hovenia dulcis, we studied the
effect of auxins, cytokinins, absence of light, and silver nitrate on the development of friable callus. Callus
cultures were established for the first time and used to obtain cell suspension cultures. Supplementation with
KIN (Kinetin) produced calli with both compact and friable areas, while the addition of TDZ (Thidiazuron)
only produced compact callus. The maintenance of cultures in the dark induced a slight enhancement on
friability when the auxin PIC (Picloram) was present in the culture medium. The addition of silver nitrate
promoted the formation of friable calli. Dry weight analysis showed no significant differences in biomass
growth, and, therefore, 2.0 mg.L-1 was considered the most suitable treatment. The presence of silver nitrate
was not required for the establishment of cell suspension cultures. Dry weight analysis of cell suspensions
showed higher biomass production in the absence of silver nitrate. PIC promoted 100% of cell suspension
culture formation in the absence of silver nitrate, and higher biomass production was observed with the lowest
concentration (0.625 mg.L-1). No morphological differences were observed among the different concentrations
of PIC. Phytochemical screening showed the presence of saponins, flavonoids, flavonols and catechins in the
extracts obtained from H. dulcis calli. These results show that the cell cultures herein established are potential
sources for the production of H. dulcis secondary metabolites of medicinal interest.

Key words: cytokinins, medicinal plant, plant tissue culture, saponins, silver nitrate.




Resumo

Plantas medicinais são uma importante opção terapêutica para uma grande parte da população mundial. A
fim de se estabelecer um sistema in vitro para a produção de metabólitos secundários de Hovenia dulcis, foram
estudados os efeitos de auxinas, citocininas, ausência de luz e nitrato de prata no desenvolvimento de
calos friáveis. Culturas de calos friáveis foram estabelecidas pela primeira vez para a espécie e usadas na
obtenção de culturas de células em suspensão. A suplementação com KIN (Cinetina) produziu calos com
regiões compactas e friáveis, enquanto a adição do TDZ (Thidiazuron) produziu somente calos compactos. A
manutenção das culturas no escuro induziu o aumento da friabilidade quando a auxina PIC (picloram) estava
presente no meio de cultura. A adição do nitrato de prata promoveu a formação de calos friáveis. A análise
do peso fresco não demonstrou diferença significativa na produção de biomassa e por essa razão 2.0 mg.L-1
foi considerada a concentração mais apropriada. A presença do nitrato de prata não foi necessária para o
estabelecimento de culturas de células em suspensão, e a análise do peso seco das culturas demonstrou maior
acúmulo de biomassa na ausência dessa substância. O uso de PIC (picloram) na menor concentração (0.625
mg.L-1) promoveu 100% de formação de culturas de células em suspensão na ausência de nitrato de prata com
a maior produção de biomassa. Não foram observadas diferenças morfológicas nas diferentes concentrações
de PIC. A análise fitoquímica demonstrou a presença de saponinas, flavonoides, flavonóis e catequinas nos
extratos obtidos a partir de calos de H. dulcis. Estes resultados demonstram que as culturas de células aqui
estabelecidas são potenciais fontes de produção de metabólitos secundários de H. dulcis.

Palavras-chave: citocininas, planta medicinal, cultura de tecidos vegetais, saponinas, nitrato de prata