Putative pathogenicity genes of Aspergillus niger in sisal and their expression in vitro
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Em: Revista Brasileira de Ciências Agrárias (Brazil) v. 12(4) p. 441-445; (2017)Sumário:
ABSTRACT - Sisal (Agave sisalana Perrine ex Engelm) is cultivated in large areas of the Brazilian semi-arid Northeastern region. This crop allows thousands of people to obtain minimal wages. However, a disease known as bole rot, caused by Aspergillus species, is causing a decline in production. The objective of this study was to investigate the involvement of hydrolytic enzymes (cellulase, cutinase, protease and lipase) and ochratoxin A in an in vitro simulation of the interaction between A. niger Tiegh. and sisal to understand the mechanisms of fungal pathogenicity. Primers for cutinase lipase, protease, ochratoxin A, and elongation factor 1-α (EF), with this last one used as endogenous control were designed and optimized for real time quantitative PCR (qPCR) with the SYBR Green methodology. The genes potentially involved in the pathogenicity of A. niger showed higher expression in medium supplemented with sisal as compared to the minimal medium. The primers reported herein will allow detailed studies of the biological events leading to bole rot disease in sisal. These results represent the first data on genes putatively involved in the pathogenicity of A. niger to sisal.
Key words: Agave sisalana; bole rot disease; quantitative real time PCR. Sumário:
RESUMO - O sisal (Agave sisalana Perrine ex Engelm) é cultivado em larga escala na região semi-árida do Nordeste brasileiro. Esta planta proporciona a obtenção de renda mínima para milhares de famílias. No entanto, observa-se um declínio da cultura do sisal devido à podridão vermelha do caule do sisal, doença causada por espécies de Aspergillus. O objetivo desse trabalho foi estudar o envolvimento dos genes que codificam a micotoxina ocratoxina A e enzimas hidrolíticas (celulase, cutinase, protease e lipase) em uma simulação in vitro da interação entre A. niger Tiegh. e sisal para entender os mecanismos de patogenicidade do fungo. Primers para celulase, cutinase, lipase, protease, ocratoxina A, fator de elongação 1-α (EF), sendo o último utilizado como controle endógeno, foram desenhados e otimizados para amplificação por PCR em Tempo Real (qPCR) utilizando a metodologia SYBR Green. Os genes potencialmente envolvidos na patogenicidade de A. niger apresentaram maior expressão no meio suplementado com sisal, quando comparado com o meio mínimo. Os primers relatados nesse trabalho permitirão a realização de estudos detalhados dos eventos que levam a podridão vermelha do sisal. Os resultados apresentados representam as primeiras informações sobre os genes de A. niger potencialmente envolvidos na patogenicidade ao sisal.
Palavras-chave: Agave sisalana; podridão vermelha do sisal; PCR em tempo real
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Periódicos
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Biblioteca Nacional de Agricultura - Binagri | Periódicos agrícolas | 2017 v. 12(4) | Texto integral (PDF) | Consulta local | 2026-0786 |
Publicação online; 20 ref.; Summaries (En, Pt)
ABSTRACT - Sisal (Agave sisalana Perrine ex Engelm) is cultivated in large areas of the Brazilian semi-arid Northeastern region. This crop allows thousands of people to obtain minimal wages. However, a disease known as bole rot, caused by Aspergillus species, is causing a decline in production. The objective of this study was to investigate the involvement of hydrolytic enzymes (cellulase, cutinase, protease and lipase) and ochratoxin A in an in vitro simulation of the interaction between A. niger Tiegh. and sisal to understand the mechanisms of fungal pathogenicity. Primers for cutinase lipase, protease, ochratoxin A, and elongation factor 1-α (EF), with this last one used as endogenous control were designed and optimized for real time quantitative PCR (qPCR) with the SYBR Green methodology. The genes potentially involved in the pathogenicity of A. niger showed higher expression in medium supplemented with sisal as compared to the minimal medium. The primers reported herein will allow detailed studies of the biological events leading to bole rot disease in sisal. These results represent the first data on genes putatively involved in the pathogenicity of A. niger to sisal.
Key words: Agave sisalana; bole rot disease; quantitative real time PCR.
RESUMO - O sisal (Agave sisalana Perrine ex Engelm) é cultivado em larga escala na região semi-árida do Nordeste brasileiro. Esta planta proporciona a obtenção de renda mínima para milhares de famílias. No entanto, observa-se um declínio da cultura do sisal devido à podridão vermelha do caule do sisal, doença causada por espécies de Aspergillus. O objetivo desse trabalho foi estudar o envolvimento dos genes que codificam a micotoxina ocratoxina A e enzimas hidrolíticas (celulase, cutinase, protease e lipase) em uma simulação in vitro da interação entre A. niger Tiegh. e sisal para entender os mecanismos de patogenicidade do fungo. Primers para celulase, cutinase, lipase, protease, ocratoxina A, fator de elongação 1-α (EF), sendo o último utilizado como controle endógeno, foram desenhados e otimizados para amplificação por PCR em Tempo Real (qPCR) utilizando a metodologia SYBR Green. Os genes potencialmente envolvidos na patogenicidade de A. niger apresentaram maior expressão no meio suplementado com sisal, quando comparado com o meio mínimo. Os primers relatados nesse trabalho permitirão a realização de estudos detalhados dos eventos que levam a podridão vermelha do sisal. Os resultados apresentados representam as primeiras informações sobre os genes de A. niger potencialmente envolvidos na patogenicidade ao sisal.
Palavras-chave: Agave sisalana; podridão vermelha do sisal; PCR em tempo real
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