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ABSTRACT - An efficient protocol for in vitro flowering was successfully established
for Impatiens balsamina cv Dwarf Bush, an important medicinal plant, through tissue
culture techniques. Shoot, stem and petiole explants obtained from 4 week-old aseptic
seedlings cultured on MS medium supplemented with different concentrations of
plant growth regulator (PGR) were used for in vitro flower induction. Gibberellic acid
(GA3), benzylaminopurine (BAP) and kinetin (Kin) treatment singly applied in MS
media (pH 5.8), could all stimulate flowering at 23-26 o
C with photoperiod of 16 hours
light and 8 hours dark. It was observed that shoot explants were more responsive
than stem explants in floral formation. Regeneration was achieved via direct
organogenesis. For shoot explants, the treatment that induced the highest rate of
in vitro flowering (7.30 ± 0.16 flowers per plantlet) was 1.0 mg L-1 GA3
. Ultrastructural
and histological analysis of in vivo and in vitro flowers were done to discover any
somaclonal variation. This research described a simple protocol for rapid in vitro
flowering that will be very
beneficial for further breeding, cytological and molecular biology research.

Keywords: in vitro regeneration, ultrastructural, histology, gibberellic acid, flowering
response.

RESUMO - Um protocolo eficiente para a floração in vitro foi estabelecido com
sucesso para Impatiens balsamina cv. Dwarf Bush, uma planta medicinal importante,
através de técnicas de cultura de tecidos. Foram utilizados explantes com broto, talo
e pecíolo, extraídos de mudas assépticas com quatro semanas de vida, cultivadas em
meio MS, suplementadas com diferentes concentrações de reguladores de crescimento
de plantas (RCP), para indução de floração in vitro. O tratamento com ácido
giberélico (GA3), benzilaminopurina (BAP) e cinetina (Kin), aplicado isoladamente
em meio MS (pH 5,8), conseguiu estimular a floração a 23-26 o
C, com fotoperíodo de
16 horas com luz e 8 horas sem. Observou-se que os explantes de broto eram mais
responsivos que os explantes de talo na formação floral. A regeneração foi obtida
via organogênese direta. Para explantes de broto, o tratamento que induziu a maior
taxa de floração in vitro (7,30 ± 0,16 flores por plântula) foi o de 1,0 mg L-1 GA3.
Análises ultraestruturais e histológicas de flores in vivo e in vitro foram realizadas
para detectar qualquer variação somaclonal. Esta pesquisa descreveu um protocolo
simples para a rápida floração in vitro, que será muito benéfico para futuras pesquisas
em genética, citologia e biologia molecular.

Palavras-chave: regeneração in vitro, ultraestrutural, histologia, ácido giberélico,
resposta da floração.