Flores, R. creator Maldaner, J. creator Brondani, D. creator Cezarotto, V. creator Giacomelli, S.R. creator Garlet, T.M.B. creator Nicoloso, F.T. creator text periodical abstract or summary bl. continuing eng ABSTRACT: This study aimed to establish calli from nodal segments of P. tuberosa and to evaluate the effect of plant growth regulators (PGR) on plant regeneration and production of β-ecdysone from in vitro-grown tissues. Calli were induced from nodal segments on Murashige and Skoog (MS) basal medium supplemented with 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) combined with N6-benzylaminopurine (BAP). The β-ecdysone concentrations [on a dry weight (DW) basis] in in vitro grown and field-grown tissues were measured by high performance liquid chromatography. Direct regenerants (ranging from 4.0 to 75.0%) arose from sprouts present in the explants only in the medium containing 2,4-D. Maximum frequency of indirect shoot regeneration from calli (20.0%) was observed in the medium containing 2,4-D and BAP (1.0 µM at each). The accumulation of β-ecdysone in the calli was associated with the presence of shoots and influenced by the concentrations of 2,4-D. Higher amounts of β-ecdysone were observed in the calli grown with 10.0 µM 2,4-D [0.516% (w/w; DW)], whose content was almost twice that found in the shoots [0.333% (w/w; DW)] from field-grown plants. Calli grown under 1.0 to 5.0 µM 2,4-D presented lower β-ecdysone concentrations than those found in the shoot, but higher than those detected in the roots from field-grown plants [0.022% (w/w; DW)]. Our study is the first report on the presence of ecdysteroids in the organogenic calli of P. tuberosa, and may be useful for several biotechnological applications and/or in vitro propagation approaches. Keywords: In vitro culture, ecdysteroid, Brazilian ginseng, Amaranthaceae. RESUMO: Regeneração direta e indireta em Pfaffia tuberosa (Spreng.) Hicken e sua produção de β-ecdisona. Este estudo teve como objetivo estabelecer calos em P. tuberosa e avaliar o efeito de reguladores vegetais sobre a regeneração e a produção de β-ecdisona. Os calos foram induzidos a partir de segmentos nodais em meio de Murashige e Skoog, acrescido de 2,4-D e BAP. O teor de β-ecdisona (com base na biomassa seca), nos tecidos in vitro e em plantas a campo, foi avaliado por cromatografia liquida de alta eficiência. Observou-se regeneração direta de brotos (4 a 75%) somente nos explantes cultivados na presença do 2,4-D. A maior frequência de regeneração indireta a partir dos calos (20%) foi registrada em meio com 2,4-D e BAP (1 µM de cada). O teor de β-ecdisona nos calos foi associado com a presença de brotos e influenciado pelas concentrações de 2,4-D. Maiores quantidades de β-ecdisona foram observadas nos calos cultivados com 10 µM de 2,4-D (0,516%), cujo teor foi quase duas vezes maior que o encontrado nos brotos (0,333%) das plantas a campo. Calos cultivados com concentrações de 1 a 5 µM de 2,4-D apresentaram menores teores de β-ecdisona quando comparado com aqueles encontrados nos brotos, mas maiores que o detectado nas raízes (0,022%) das plantas a campo. Este é o primeiro estudo que mostra a presença de ecdisteróides em calos organogênicos de P. tuberosa. Palavras-chave: cultivo in vitro, ecdisteróides, ginseng brasileiro, Amaranthaceae. Publicação on-line; 25 ref.; 1 table; 1 illus.; Summaries (En, Pt) CULTIVO IN VITRO PLANTA MEDICINAL AMARANTHACEAE Botucatu-SP Instituto de Biociências - Departamento de Química e Bioquímica 1998 2024-3719 1516-0572 BR2024002111 v. 19(2) p. 266-273; (2017) https://www.sbpmed.org.br/admin/files/papers/file_EZHABDH1EQYU.pdf https://www.sbpmed.org.br/admin/files/papers/file_EZHABDH1EQYU.pdf BR-BrBNA 240812 20240812110640.0 eng