O presente trabalho teve como objetivo estabelecer protocolo para regeneração in vitro de S. chilensis via organogênese direta. Para o estabelecimento in vitro foram testados dois tipos de antioxidantes: carvão ativado (0,3%) adicionado ao meio de cultura e imersão em solução de ácido ascórbico (2%) por 20 minutos, e tipos de explantes: segmentos basais e medianos de lâmina foliar, segmentos intermodais e nodais caulinares, apicais e medianos. Também foram testados tipos de fechamento dos tubos (com filme PVC e algodão), e analisada a anatomia das plantas. Para aclimatização, vasos contendo fibra de coco, areia e terra vegetal foram mantidos em casa de vegetação. As plantas foram regadas três vezes por semana com 2 ml de solução de Hoagland (1/4 de força). Depois de quinze dias as tampas das garrafas foram desenroscadas, no trigésimo dia as mudas foram transferidas para sacos de polietileno, avaliada porcentagem de sobrevivência e crescimento durante 60 dias. Segmentos nodais medianos apresentaram maior taxa de multiplicação do que apicais e folhas. Não foi observado declínio na taxa de propagação no decorrer de quatro subcultivos in vitro e o pH das culturas se manteve estável. Foi estabelecido com sucesso o protocolo de micropropagação de S. chilensis e as mudas apresentaram alto índice de sobrevivência na fase de aclimatização.
Palavras-Chave: Clonagem, fechamento do tubo, tampa de algodão, tecidos vegetais.
ABSTRACT:
In vitro regeneration of Solidago chilensis (Asteraceae) by direct organogenesis. The present work aimed to establish a protocol for in vitro regeneration of S. chilensis by direct organogenesis. In order to establish in vitro were tested two types of antioxidants: activated carbon (0.3%) added to culture medium and immersion in solution of ascorbic acid (2%) for 20 minutes; and types of explants: basal and median of leaf segments, intermodal and nodal stem segments, apical and median. Were also tested the tube closure types (with PVC film and cotton), and analyzed the anatomy of plants. For acclimatization, vessels containing coconut fiber, sand and topsoil were kept in the greenhouse. Plants were watered three times a week with 2 ml of Hoagland solution (1/4 strength). After fifteen days the caps of the bottles were unscrewed, on the thirtieth day, transferred to polyethylene bags, and evaluated the percentage of survival and growth parameters, for 60 days. Median nodal segments showed higher multiplication rate than apical and leaves. There was no decline in the propagation rate over four subcultures in vitro and the pH remained stable. It was successfully established the micropropagation protocol of S. chilensis and the seedlings had a high survival rate in the acclimatization phase.