Moustacas, V.S. creator Silva, T.M.A. creator Costa, É.A. creator Costa, L.F. creator Paixão, T.A. creator Santos, R.L. creator text periodical abstract or summary bl. continuing eng RESUMO - A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécieespecíficos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados. Palavras-chave: epididimite infecciosa, ovinos, diagnóstico, PCR Publicação online; 12 ref.; 2 tables; Summary (Pt) OVINO DOENÇA ANIMAL DIAGNÓSTICO REPRODUÇÃO ANIMAL VETERINÁRIA Belo Horizonte-MG Universidade Federal de Minas Gerais - Escola de Veterinaria 1983 2024-2263 0102-0935 BR2024004278 v. 67(6) p. 1751-1755; (2015) https://www.scielo.br/j/abmvz/a/B96NQz53B9YmqNQR6DPtQVr/?format=pdf&lang=en https://www.scielo.br/j/abmvz/a/B96NQz53B9YmqNQR6DPtQVr/?format=pdf&lang=en BR-BrBNA 241227 20241227110723.0 eng