TY  - SER
AU  - Moustacas, V.S. 
AU  - Silva, T.M.A. 
AU  - Costa, É.A. 
AU  - Costa,  L.F. 
AU  - Paixão, T.A. 
AU  - Santos, R.L. 
TI  - Real-time PCR for detection of Brucella ovis and Histophilus somni in ovine urine and semen
KW  - OVINO
KW  - DOENÇA ANIMAL
KW  - DIAGNÓSTICO
KW  - REPRODUÇÃO ANIMAL
KW  - VETERINÁRIA
N1  - Publicação online; 12 ref.; 2 tables;  Summary (Pt)
N2  - 


RESUMO - A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécieespecíficos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados.


Palavras-chave: epididimite infecciosa, ovinos, diagnóstico, PCR
UR  - https://www.scielo.br/j/abmvz/a/B96NQz53B9YmqNQR6DPtQVr/?format=pdf&lang=en
ER  -