02269nab a2200301 i 4500003000900000005001700009008004100026040001800067072001400085100002100099100001900120100001900139100001800158100002000176100001800196245009600214500006000310520116200370650001001532650002001542650001801562650002601580650001801606773023601624856008001860942000801940999001901948BR-BrBNA20241227110723.0241227b2015    bl.|r|pooa||| 00| 0 eng |  aBR-BrBNAbeng  aL73b5240  aMoustacas, V.S.   aSilva, T.M.A.   aCosta, É.A.   aCosta,  L.F.   aPaixão, T.A.   aSantos, R.L.   aReal-time PCR for detection of Brucella ovis and Histophilus somni in ovine urine and semen  aPublicação online; 12 ref.; 2 tables;  Summary (Pt)  a


RESUMO - A epididimite infecciosa ovina é uma das principais enfermidades reprodutivas de carneiros. O presente estudo teve por objetivo desenvolver protocolos de PCR em tempo real para B. ovis e H. somni e avaliar sua aplicabilidade em amostras de sêmen e urina de carneiros. Delinearam-se primers e sondas espécieespecíficos para cada agente. As sondas foram delineadas com o sistema TaqMan incorporando um marcador FAM para B. ovis e Cy5 para H. somni na extremidade 5' e um quencher na extremidade 3'. A PCR em tempo real para B. ovis e H. somni foi altamente sensível, uma vez que a amplificação de DNA ocorreu com até 0,2ng de DNA/reação. A especificidade dos iniciadores e sondas foi avaliada com amostras de DNA de outros agentes causadores de epididimite ovina e nenhuma amplificação inespecífica foi observada. A aplicabilidade da técnica em amostras biológicas também foi confirmada, pois não houve perda de eficácia (P>0,05) quando comparada à PCR convencional com amostras de sêmen e urina de carneiros experimentalmente infectados.


Palavras-chave: epididimite infecciosa, ovinos, diagnóstico, PCR  aOVINO  aDOENÇA ANIMAL  aDIAGNÓSTICO  aREPRODUÇÃO ANIMAL  aVETERINÁRIA0 016439315898dBelo Horizonte-MG Universidade Federal de Minas Gerais - Escola de Veterinaria 1983o2024-2263tArquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia (Brazil)x0102-0935gv. 67(6) p. 1751-1755; (2015)wBR2024004278  uhttps://www.scielo.br/j/abmvz/a/B96NQz53B9YmqNQR6DPtQVr/?format=pdf&lang=en  cANA  c329455d329455