TY - SER AU - Faganello, Fernanda de Sillos AU - Carrer Filho, Renato AU - Dias, Vanessa Duarte AU - Morello, Regina Melo Sartori Coelho AU - Cunha, Marcos Gomes da TI - Molecular diagnosis of Guignardia citricarpa in asymptomatic sweet orange tissue KW - LARANJA KW - DOENÇA FÚNGICA KW - LEVANTAMENTO FITOSSANITÁRIO KW - DEFESA VEGETAL KW - CITRICULTURA N1 - Publicação online; 16 ref.; 2 tables; Summaries (En, Pt) N2 - ABSTRACT – Citrus black spot, a fungal disease caused by the quarantine fungus Guignardia citricarpa, restricts the exportation of fresh fruit to countries in the European Union. The occurrence of latent infections and the time required for diagnosis using conventional methods have brought about the need to validate fast, efficient and reproducible molecular techniques to detect the pathogen in asymptomatic tissue. As such, this study aims to detect G. citricarpa in the symptomatic fruit and asymptomatic leaf tissue of sweet oranges by conventional and real-time polymerase chain reaction (PCR). Specificity and limit of detection (LOD) were assessed in tissue samples of fruit lesions and asymptomatic leaves. Low concentrations of the fungus were found in asymptomatic leaves. Under these conditions, real-time PCR proved to be viable, reproducible and highly sensitive to detection of the pathogen. Index terms: Citriculture, molecular diagnosis, Phyllosticta citricarpa; RESUMO – A pinta preta ou mancha preta dos citros, causada pelo fungo Guignardia citricarpa, é considerada uma doença quarentenária, que impõe restrições ao transporte de frutas frescas para países da União Europeia. A ocorrência de infecções latentes e o tempo para o diagnóstico por métodos convencionais levam à necessidade de validar protocolos moleculares rápidos, eficientes e reprodutíveis para detecção do patógeno em tecidos assintomáticos. Assim, este trabalho visou detectar G. citricarpa em tecidos de frutos sintomáticos e em folhas assintomáticas de laranja Pêra por PCR convencional e por PCR em tempo real. A especificidade e o limite de detecção foram avaliados em amostras de tecidos de lesões em frutos e em folhas assintomáticas. Em folhas assintomáticas a presença do fungo foi detectada em baixas concentrações, nessas condições, a PCR em tempo real demonstrou ser viável, reprodutível e altamente sensível para a detecção do patógeno. Termos para indexação: Citricultura, diagnose molecular, Phyllosticta citricarpa UR - https://www.scielo.br/j/rbf/a/7P83srM6fvnKbXd7vLFhMTN/?format=pdf&lang=en ER -